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對於顯色液的使用你做的正確嗎?看這裏
發布時間:2020-09-26   點擊次數:146次
  顯色液是一種采用了較新單一溶液顯色技術,通過辣根過氧化物酶(HRP)催化TMB顯色,用於ELISA等的顯色液。本顯色液也可以用於檢測血液或血紅蛋白等樣品中的過氧化物酶含量。
 
  通常的顯色試劑由多個組份組成,必須在使用前進行配製,並且容易產生沉澱,使用相對不太方便,並且也容易導致檢測結果不太穩定。本顯色液采用了較新的顯色技術,把所有的相關試劑全部配製在一個溶液中,僅由單一溶液組成,簡化了操作步驟,並且使檢測結果更加穩定可靠。
 
  顯色液的使用方法:
 
  用適當的幹淨容器(用純淨水反複衝洗),倒出適量的單組分TMB顯色液,待達到室溫後即可使用。
 
  加液:加完HRP結合物並孵育一定時間後,用適當洗滌液洗板3-5次,每孔加TMB顯色液100ul。 根據個人實驗需要,在室溫(15-25℃)或37℃下避光溫育10-30分鍾或更長時間,直至顯色至預期深淺。
 
  終止:加入等體積的1M 鹽酸或硫酸溶液終止反應,孔中反應液由藍色變為黃色。
 
  讀數:終止反應後30分鍾內在450nm處測定吸光值。
 
  注意:如果出現高的反應背景或沉澱,表明TMB底物反應過於強烈。為了避免產生沉澱,可在終止後馬上讀數;或者進一步稀釋一抗和/或HRP結合物。

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